البروتياز Staphylococcus Aureus v8 الذي يمكن استخدامه بمفرده أو مع البروتياز الأخرى

البروتياز Staphylococcus Aureus v8 الذي يمكن استخدامه بمفرده أو مع البروتياز الأخرى

درجة التسلسل بروتياز V8

رقم الكتالوج:V813

CAS:66676-43-5

EC:3.4.21.19

Fأول نame:تسلسل الصف المؤتلف البروتياز V8 ؛ Staphylococcus aureus سلالة V8

سيnonymس:V8 البروتياز ؛ Endoproteinase Glu-C ؛ Endoproteinase Asp-C

درجة حرارة التخزين: 2-8 درجة مئوية

مصدر: المؤتلف بروتياز V8 هو بروتين معدل وراثيا يتم التعبير عنه في بكتريا قولونية

1. وصف

المؤتلف V8 بروتياز هو عائلة سيرين بروتياز ويمكن على وجه التحديد تحلل حمض الجلوتاميك أو بقايا حمض الأسبارتيك روابط الببتيد الجانبية الكربوكسية.يمكن تحديد رابطة الببتيد الطرفية لـ Glu carboxy وشقها في CH₄كونه₄ عازلة (pH 7.8) و NH₄HCO₃ (الرقم الهيدروجيني 4.0). حدد وشق رابطة الببتيد الطرفية Glu أو Asp carboxy في المخزن المؤقت للفوسفات (pH 7.8) ، وكان معدل التحلل المائي لـ Glu أعلى من Glu Asp.البروتياز المؤتلف V8 له نشاط بين 4.0-10.0 ، ودرجة الحموضة المثلى هي 8.0-8.5.يمكن استخدامه بمفرده أو بالاشتراك مع البروتياز الأخرى عند استخدامه في هضم البروتين ، وتحديد ملامح الببتيد وتحليل بصمات كتلة الببتيد.مثبطات البروتياز V8 هي ثنائي أيزوبروبيل فلورو فوسفات (DFP) ، α2-macroglobulin و Nα-P-tosyl-L-lysine كلورو ميثيل كيتون (TLCK).

2. الخصائص الرئيسية

تعريف الوحدة: يتم تعريف وحدة واحدة على أنها كمية الإنزيم المطلوبة للركيزة التحفيزية Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide أنتجت 1 ميكرومول من 4-nitroaniline في الدقيقة عند 25 درجة مئوية ودرجة الحموضة 7.8.

3. استقرار التخزين والنقل

استقرار التخزين: يجب تخزين بروتياز المؤتلف V8 تحت 2-8 درجة مئوية في حاوية محكمة الغلق.إنه مستقر في غضون 6 أشهر بعد إذابته بـ1 ملي مولار حمض الهيدروكلوريك و 50 ملي مولار HAC عند -20 درجة مئوية أو أقل.إنه مستقر في غضون شهرين بعد إذابته بـ 1 ملي مولار من حمض الهيدروكلوريك و 50 ملي مولار HAC عند 4 درجات مئوية ، ويمكن الاحتفاظ بنسبة 85٪ من النشاط أعلاه بعد إذابته بـ 1 ملي مولار حمض الهيدروكلوريك و 50 ملي مولار HAC عند 25 درجة مئوية أو 37 درجة مئوية 12 ساعةلا توجد خسارة في النشاط بعد 10 مرات متكررة من التجميد والذوبان.

استقرار النقل: المنتج مستقر بمقدار bلنقل عازل الجليد.

4. صهتشيد الاستخدام

لاحظ أنه قبل استخدام

1) قسّم المادة وفقًا لكمية الاستخدام لتجنب التلوث أو القطع الذاتي.

2) حل البروتين الهدف.

يتم إذابة البروتين المستهدف بواسطة محلول الانقسام ، على سبيل المثال 25-50 ملي مولار NH₄HCO₃ الرقم الهيدروجيني 7.8 ، إذا كانت قابلية ذوبان البروتين المستهدف غير جيدة ، فسيتم تغيير طبيعة البروتين المستهدف عن طريق إضافة اليوريا أو SDS أو DTT أو التسخين.تظهر تأثيرات اليوريا و SDS على بروتياز V8 في الجدول 1.

3) خلاصة

النسبة الموصى بها لبروتياز V8 والبروتين المستهدف هي 1: 20-1: 100 (وزن / وزن) عند 25 درجة مئوية أو 37 درجة مئوية هضم البروتين 2-18 ساعة.

الجدول 1: استقرار البروتياز V8 في تركيزات مختلفة من مذيب ، اليوريا 25 درجة مئوية 2 ساعة ، SDS 25 درجة مئوية 12 ساعة

4) مثال تطبيقي: البروتياز المؤتلف V8 يهضم الأنسولين

100 ميكرولتر من محلول الأنسولين + 198 مايكرولتر 0.4 م Tris-HCl pH 8.0 + 60μl 0.1٪ V8 Protein solution + ultrapure water to 400μlتفاعل حمام مائي 37 درجة مئوية لمدة ساعتين ، بالإضافة إلى 6 ميكرولتر من محلول حمض الفوسفوريك لإنهاء التفاعل ، وتحليل عمود C18:

5. المنتج ميزة

(1) البروتين المؤتلف بدرجة التسلسل: خصوصية عالية واستقرار جيد.

(2) خالٍ من أصل حيواني: بروتياز V8 المؤتلف ليس تلوثًا خارجيًا بالفيروس ، ولا يتم استخدام أي مادة من أصل حيواني في عملية الإنتاج.

(3) الجودة المستقرة: يمكن أن يضمن الإنتاج الضخم إنتاجًا مستقرًا ومستمرًا للدفعة.لا يوجد فرق بين الدُفعة وجودة المنتج مستقرة.

(4) نقاوة عالية: نشاط نوعي أعلى ، بقايا البروتين المضيف أقل من حدود المنتجات البيولوجية

(5) مسحوق مجفف بالتجميد: المنتج عبارة عن مسحوق مجفف بالتجميد وسهل التخزين والنقل.

(6) الامتثال للمتطلبات التنظيمية: تتوافق معدات الإنتاج وبيئة الإنتاج مع المتطلبات التنظيمية ذات الصلة ، وتتوافق عملية الإنتاج تمامًا مع نظام الجودة NSF ISO 9001: 2015 وإرشادات GMP.

(7) مستندات الجودة الكاملة: يمكننا تقديم ملفات الدعم المنتظمة ذات الصلة وفقًا لمتطلبات العملاء.

6.المنتجات ذات الصلة

إنزيم إنتيروكيناس المؤتلف

تسلسل الصف التربسين

تسلسل كيموتربسين الصف

تسلسل الصف carboxypeptidase ب